背景 
在過去十年中，我們的雙鏈 RNA (dsRNA) 抗體已被廣泛用于檢測和表征具有 dsRNA 基因組或中間體的動植物病毒。此外，抗 dsRNA 抗體可用作檢測病原體的診斷工具，包括在石蠟包埋的固定組織樣本中進(jìn)行檢測（Richardson 等，2010）。K1 單克隆抗體識別 dsRNA 的親和力與我們廣泛使用的 J2 抗體相似。可用于細(xì)胞和組織中dsRNA的組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)檢測。事實證明，在 J2 無法提供令人滿意結(jié)果的罕見實驗設(shè)置中，它作為 J2 的替代品特別有用，可以解決交叉反應(yīng)和/或去除不需要的背景。K1 可用于檢測多種病毒的 dsRNA 中間體，如肝炎病毒、泰勒氏鼠腦脊髓炎病毒或日本腦炎病毒。它用于檢測培養(yǎng)細(xì)胞和固定石蠟包埋的組織學(xué)樣品中的 dsRNA（參見出版物）。如果需要檢測 Poly I:C，我們會高度使用 K1 而不是 J2，因為 K1 對這種合成的聚核糖核苷酸具有更高的親和力（參見 Schönborn 等，1991，圖 2）。K1 已成功用于免疫熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù) (FACS) 和免疫捕獲方法（如斑點印跡和 ELISA）。J5 IgG2b 抗體識別 dsRNA 的親和力和特異性與我們的 J2 抗體非常相似（參見 Schonborn 等，1991），但具有不同的同種型——因此可以更靈活地同時檢測 dsRNA 與其他標(biāo)記物，尤其是在免疫熒光顯微鏡下, 并已被用于檢測魚病毒傳染性胰腺壞死病毒 (IPNV)（Levican-Asenjo 等人，2019 年）或 Vero 細(xì)胞中的 ECMV 的復(fù)制中間體。J5 抗體可以檢測所有測試形式的 dsRNA，包括來自登革熱病毒、腦心肌炎病毒、痘苗病毒、呼腸孤病毒或黃瓜花葉病毒等病毒的 poly(A):poly(U)、poly(I):poly(C) 和 dsRNA病毒。與我們的其他抗體類似，J5 的 dsRNA 結(jié)合與序列無關(guān)，只要 dsRNA 的長度超過 40nt。該抗體不與 ssRNA、ssDNA 或 dsDNA 發(fā)生反應(yīng)。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術(shù)中成功測試。J5 抗體可以檢測所有測試形式的 dsRNA，包括來自登革熱病毒、腦心肌炎病毒、痘苗病毒、呼腸孤病毒或黃瓜花葉病毒等病毒的 poly(A):poly(U)、poly(I):poly(C) 和 dsRNA病毒。與我們的其他抗體類似，J5 的 dsRNA 結(jié)合與序列無關(guān)，只要 dsRNA 的長度超過 40nt。該抗體不與 ssRNA、ssDNA 或 dsDNA 發(fā)生反應(yīng)。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術(shù)中成功測試。J5 抗體可以檢測所有測試形式的 dsRNA，包括來自登革熱病毒、腦心肌炎病毒、痘苗病毒、呼腸孤病毒或黃瓜花葉病毒等病毒的 poly(A):poly(U)、poly(I):poly(C) 和 dsRNA病毒。與我們的其他抗體類似，J5 的 dsRNA 結(jié)合與序列無關(guān)，只要 dsRNA 的長度超過 40nt。該抗體不與 ssRNA、ssDNA 或 dsDNA 發(fā)生反應(yīng)。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術(shù)中成功測試。該抗體不與 ssRNA、ssDNA 或 dsDNA 發(fā)生反應(yīng)。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術(shù)中成功測試。該抗體不與 ssRNA、ssDNA 或 dsDNA 發(fā)生反應(yīng)。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術(shù)中成功測試。

同義詞： Anti-dsRNA mAb 比較集

來源 
雌性 DBA/2 小鼠腹膜內(nèi)注射 50 ug L-dsRNA 和 75 ug 甲基化牛血清白蛋白的混合物，乳化在*弗氏佐劑中。在幾次加強后，脾細(xì)胞與 Sp2/0-Agl4 骨髓瘤細(xì)胞融合以產(chǎn)生雜交瘤克隆。

產(chǎn)品 
小鼠單克隆抗體 J2 可識別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長度大于或等于 40 bp。dsRNA 識別與抗原的序列和核苷酸組成無關(guān)。迄今為止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 J2 識別，盡管在某些分析中它對 poly (I).poly(C)比其他dsRNA抗原低約10倍。小鼠單克隆抗體 J5 可識別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長度大于或等于 40 bp。dsRNA 識別與抗原的序列和核苷酸組成無關(guān)。到目前為止，研究了所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A)。poly(U) 已被 J5 識別，盡管在某些分析中它對 poly(I).poly(C) 的親和力比對其他 dsRNA 抗原的親和力低約 10 倍。mAb K1 可識別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長度大于或等于 40 bp。dsRNA 識別與抗原的序列和核苷酸組成無關(guān)。迄今為止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對 poly(I).poly(C) 的親和力高于對其他 dsRNA 抗原的親和力，盡管表觀結(jié)合常數(shù)的差異在不同的實驗條件下可能會有所不同。mAb K1 可識別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長度大于或等于 40 bp。dsRNA 識別與抗原的序列和核苷酸組成無關(guān)。迄今為止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對 poly(I).poly(C) 的親和力高于對其他 dsRNA 抗原的親和力，盡管表觀結(jié)合常數(shù)的差異在不同的實驗條件下可能會有所不同。mAb K1 可識別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長度大于或等于 40 bp。dsRNA 識別與抗原的序列和核苷酸組成無關(guān)。迄今為止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對 poly(I).poly(C) 的親和力高于對其他 dsRNA 抗原的親和力，盡管表觀結(jié)合常數(shù)的差異在不同的實驗條件下可能會有所不同。迄今為止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對 poly(I).poly(C) 的親和力高于對其他 dsRNA 抗原的親和力，盡管表觀結(jié)合常數(shù)的差異在不同的實驗條件下可能會有所不同。迄今為止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對 poly(I).poly(C) 的親和力高于對其他 dsRNA 抗原的親和力，盡管表觀結(jié)合常數(shù)的差異在不同的實驗條件下可能會有所不同。

配方： 每個凍干樣品都應(yīng)用 100 µl 無菌蒸餾水復(fù)溶。然后將 mAb 置于 PBS 中，不含任何穩(wěn)定劑或防腐劑，濃度為 1 mgr/ml。作為凍干程序的結(jié)果，重建的抗體可能含有少量聚集體形式的變性蛋白質(zhì)，這可能會干擾某些應(yīng)用，例如免疫組織化學(xué)（例如，通過提供高背景）。因此，我們強烈建議在使用和使用上清液之前對重組的抗體進(jìn)行離心（微量離心）。

純化方法： A蛋白-瓊脂糖親和層析。

純度： 凝膠電泳純 IgG 抗體。

濃度： 重構(gòu)后的濃度：通過 A280 nm 測定的 1.00 mg/ml（A280 nm = 1.47 對應(yīng)于 1 mg/ml 抗體）。

應(yīng)用 
小鼠單克隆抗體 J2、J5 和 K1 可用于 ELISA、dsRNA 免疫印跡、免疫親和層析，在某些系統(tǒng)中還可用于免疫組織化學(xué)（參見參考資料）。對于任何特定應(yīng)用，每種抗體的最佳工作稀釋度應(yīng)通過滴定確定。請注意，dsRNA 免疫印跡之前的核酸分離必須通過聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行，因為從瓊脂糖凝膠印跡后檢測的靈敏度要低得多。不用于臨床目的。僅供體外使用。

儲存 
重建后的抗體應(yīng)分裝并儲存在 -20 °C 或 -70°C。添加 10 mM 疊氮化納后，未稀釋的抗體也可以在 +4 °C 下短時間保存。對于長期儲存，mAb 應(yīng)保持冷凍。應(yīng)避免重復(fù)冷凍/解凍循環(huán)。

運輸條件： 在環(huán)境溫度下運輸。

注意 
本產(chǎn)品僅供研究和體外測試使用，不適用于涉及人類或動物的診斷或治療程序。它可能含有危險成分。請參閱安全數(shù)據(jù)表 (SDS) 了解更多信息和正確處理程序。根據(jù)當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處理產(chǎn)品殘余物。本數(shù)據(jù)表在合理范圍內(nèi)盡可能準(zhǔn)確，但 Exalpha Biologicals 對本信息中的任何不準(zhǔn)確或遺漏不承擔(dān)任何責(zé)任。

參考 
1) F. Weber、V. Wagner、SB Rasmussen、R. Hartmann、SR Paludan。雙鏈 RNA 由正鏈 RNA 病毒和 DNA 病毒產(chǎn)生，但負(fù)鏈 RNA 病毒檢測不到。J Virol (2006), 80(10):5059-64。doi：10.1128/JVI.80.10.5059-5064.2006。2) S. Welsch、S. Miller、I. Romero-Brey、A. Merz、CKE Bleck、P. Walther、SD Fuller、C. Antony、J. Krijnse-Locker、R. Bartenschlager。登革熱病毒復(fù)制和組裝位點的組成和三維結(jié)構(gòu)。細(xì)胞宿主與微生物 (2009) 5(4)；365-375。doi.org/10.1016/j.chom.2009.03.007。3) K. Knoops, M. Bárcena, RW Limpens, AJ Koster, AM Mommaas, EJ Snijder。動脈病毒復(fù)制結(jié)構(gòu)的超微結(jié)構(gòu)表征：重塑內(nèi)質(zhì)網(wǎng)以適應(yīng)病毒 RNA 合成。J 維羅爾。(2012) 86(5)；2474-2487。doi:10.1128/JVI.06677-11。4) SJ Richardson、A. Willcox、DA Hilton、S. Tauriainen、H. Hyoty、AJ Bone、AK Foulis、NG Morgan。使用針對 dsRNA 的抗血清檢測福爾馬林固定石蠟包埋組織中的病毒感染。J 臨床病毒。(2010) 49(3); 180-5。doi：10.1016/j.jcv.2010.07.015。5) K. Karikó、H. Muramatsu、J. Ludwig、D. Weissman，生成最佳 mRNA 治療：HPLC 純化消除免疫激活并改善核苷修飾的蛋白質(zhì)編碼 mRNA 的翻譯，核酸研究 (2011) 39 (21); e142，https://doi.org/10.1093/nar/gkr695。6) Schönborn, J., Oberstrass, J., Breyel, E., Tittgen, J., Schumacher, J. 和 Lukacs, N. (1991) 雙鏈 RNA 的單克隆抗體作為粗核酸中 RNA 結(jié)構(gòu)的探針提取物。核酸研究 19, 2993-3000。7) Lukacs, N. (1994) 通過雙鏈 RNA 的單克隆抗體檢測植物中的病毒感染和區(qū)分共存病毒。J. 維羅爾。方法 47, 255-272。8) Lukacs, N. (1997) 通過結(jié)構(gòu)特異性抗 RNA 抗體檢測有義：反義雙鏈體。在：反義技術(shù)。實用方法，C. Lichtenstein 和 W. Nellen（編輯），第 281-295 頁。IRL 出版社，牛津。9) Levicán-Asenjo J、Soto-Rifo R、Aguayo F、Gaggero A、Leon O。鮭魚細(xì)胞 SHK-1 通過巨胞飲作用將傳染性胰腺壞死病毒內(nèi)化。J Fish Dis。2019 年 7 月；42(7)：1035-1046。doi：10.1111/jfd.13009。近期出版物：Tirosh Shapira、I. Abrrey Monreal、Sébastien P Dion、Mason Jager、Antoine Désilets、Andrea D Olmstead、Thierry Vandal、David W Buchholz、Brian Imbiakha、Guang Gao、Aaleigha Chin、William D Rees、Theodore Steiner、伊萬·羅伯特·納比、埃里克·馬爾索、朱莉·薩勒、艾弗里·奧古斯特、格琳德·范·德·瓦勒、加里·R·惠特克、皮埃爾-呂克·布德羅、赫克托·C·阿吉拉爾、理查德·勒杜克、弗朗索瓦·讓。一種新型高效 TMPRSS2 樣蛋白酶抑制劑可阻斷 SARS-CoV-2 相關(guān)變異，并廣泛保護(hù)小鼠免受感染和死亡。bioRxiv 2021.05.03.442520；doi：https://doi.org/10.1101/2021.05.03.442520 https://biorxiv.org/cgi/content/short/2021.05.03.442520v1